Методы высокопроизводительного секвенирования

Методы высокопроизводительного секвенирования

Важным этапом подготовки любой библиотеки для секвенирования является проверка качества и точное измерение количества полученной ДНК, как правило, для этого используют количественнлю ПЦР с детекцией в режиме реального времени. Без всякого преувеличения можно сказать, что данный этап определяет успех всего эксперимента. Методы высокопроизводительного секвенирования. Пиросеквенирование.

Первая коммерческая система параллельного секвенирования, получившая широкое распространение, основана на применении нефлуоресцентного метода детекции включения нуклеотида, получившего название пиросеквенирования. Статья, описывавшая метод пиросеквенирования, была опубликована еще в 1988 г. Статья, описывавшая метод пиросеквенирования, была оплбликована еще в 1988 г. Эдвардом Дэвидом Хайманом, в ней оно преподносилось как «совершенно новый метод секвенирования ДНК, не использующий электрофорез, радиоактивность или флуоресценцию». В качестве способа регистрации включения нуклеотида Хайман предложил измерение количества пирофосфата, выделяющегося при включении нуклеотида полимеразой в цепь ДНК: dNTP +ДНК(Х) РР, + ДНК(Х + 1). Для этого он применил системл капиллярных хроматографических колонок, содержащих ферменты, иммобилизованные на сефарозе.

Раствор, содержащий аденозин-5-фосфосульфат (APS), глюкозу, глицерин, люциферин и один из четырех нуклеотид-трифосфатов (dNTP), пропускается через колонку с фосфатазой, закрепленной на сефарозе.

1 звезда2 звезды3 звезды4 звезды5 звезд (Еще не оценили)
Загрузка ... Загрузка ...

Оставить комментарий

Почта (не публикуется) Обязательные поля помечены *

Вы можете использовать эти HTML теги и атрибуты: <a href="" title=""> <abbr title=""> <acronym title=""> <b> <blockquote cite=""> <cite> <code> <del datetime=""> <em> <i> <q cite=""> <strike> <strong>

Подтвердите, что Вы не бот — выберите самый большой кружок: